THE EFFECT OF UNFRACTIONATED HEPARIN ON LYMPHATIC DRAINAGE OF TISSUES AND PHARMACOKINETICS OF CEFOTAXIM

Full Text

Введение Нефракционированный гепарин - препарат с относительно высокой молекулярной массой (1500-2000 кД), обладающий антикоагулянтным и антитромботическим действием. Взаимодействуя с антитромбином III, он оказывает ингибирующее действие на основные ферменты свертывающей системы крови - тромбин и Ха фактор. В клинике гепарин широко применяется для профилактики и терапии тромбоэмболических заболеваний. Однако Я.Д. Мамедов показал, что введение гепарина отражается не только на свертываемости крови, но и лимфы, причем характер реакции и ее направленность сходны [1]. В настоящее время установлено, что в лимфе по сравнению с кровью, значительно меньше факторов свертывания и больше антикоагулянтов, в частности гепарина [2-4]. При этом он оказывает влияние на ЛД тканей [5]. Так, скорость лимфооттока из дренированного грудного протока животных после введения гепарина возрастает почти в 2 раза [1]. В связи с этим исследователей и практических врачей привлекает возможность использования гепарина для проведения лимфотропной терапии в качестве эндолимфатического проводника [6]. Еще в 1986 г. А.А. Баранов определил, что изотопный препарат Na131I, введенный подкожно в нижнюю треть голени кроликов после предварительной инъекции гепарина, в большей степени выявлялся в лимфе грудного протока, чем в крови [7]. Известно, что косвенным признаком наличия у препаратов свойств эндолимфатического проводника является их способность увеличивать концентрацию низкомолекулярного вещества и обеспечивать ее поддержание в плазме крови до суток. М.Ф. Губкина, Г.О. Каминская и др. продемонстрировали сохранение эффективного уровня изониазида в крови до 24 ч при введении его после инъекции гепарина, чего не наблюдалось при моновведении препарата [8, 9]. В последние годы гепарин все чаще используется в практике клинической лимфологии в качестве эндолимфатического проводника [10-12]. Между тем мы не встретили работ по изучению влияния гепарина на фармакокинетику бета-лактамных антибиотиков с определением концентрации препаратов в динамике в течение суток. Цель исследования: изучить влияние ГепН на скорость ЛД тканей и фармакокинетику бета-лактамного антибиотика ЦФ. Материал и методы Влияние ГепН на скорость ЛД тканей исследовали на белых беспородных мышах в двух группах экспериментов: контрольной и основной (по 8 животных в каждой). Во время эксперимента мыши находились под общим наркозом. За 15 мин до начала определения скорости ЛД тканей животным основной группы в заднюю лапу вводили ГепН (гепарин натрия, флаконы по 5000 МЕ/мл, ЗАО «ФармФирма «Сотекс», Россия) в дозе 13 МЕ. Животным контрольной группы инъецировали 0,3 мл физиологического раствора. Скорость ЛД тканей определяли по времени (мин) полного выведения из ткани брыжейки предварительно введенного в нее лимфотропного маркера (краситель Evans blau «Merck») в объеме 0,002 мл 2% раствора. Фармакокинетику ЦФ (клафоран, флаконы по 1,0 г, Авентис Фарма Лтд, Великобритания) оценивали на 18 половозрелых кроликах весом 3 кг. Животным контрольной группы (9 кроликов) внутримышечно в верхнюю треть задней конечности вводили антибиотик ЦФ в дозе 140 мг. Кроликам основной группы (9 животных) такую же дозу антибиотика вводили через 5 мин после предварительной инъекции ГепН в дозе 700 МЕ. Дозу препаратов рассчитывали исходя из разовой дозы, рекомендуемой для человека, по коэффициенту пересчета на массу тела животного [13]. Забор крови производили из краевой вены уха кроликов в течение суток: через 1,5 и 3 ч, 4,5 и 6 ч, 8, 12 и 24 ч после инъекции лекарственных препаратов. Для исследования концентрации ЦФ в тканях использовали белых беспородных мышей весом 20 г. Животным двух контрольных групп (по 9 мышей в каждой) в мышцу задней лапы вводили ЦФ в дозе 3 мг [13]. Мышам двух основных групп (по 9 животных в каждой) такую же дозу антибиотика вводили через 5 мин после предварительной инъекции ГепН в дозе 13 МЕ. У животных контрольных и основных групп определяли уровень ЦФ в плазме крови и органах (ткани печени и стенки кишечника) через 1,5 ч (первые группы экспериментов) и 24 ч (вторые группы экспериментов) после введения препаратов. Дополнительно рассчитывали соотношение концентраций антибиотика «ткань печени/плазма крови». Концентрацию ЦФ в пробах плазмы крови и тканях животных определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Полученные результаты обработаны методами вариационной статистики по Стьюденту для связанных и несвязанных величин. Результаты Время выведения лимфотропного красителя из брыжейки мышей контрольной группы составляло 40,75±0,56 мин, а у животных основной группы - 28,50±0,57 мин (р<0,001). Следовательно, ГепН ускорял ЛД тканей на 30%. Изменение концентрации ЦФ в плазме крови кроликов под влиянием ГепН отражено в табл. 1. На протяжении всего исследования уровень антибиотика при его введении после ГепН был выше, чем при инъекции только ЦФ. Через 1,5 часа содержание ЦФ в плазме крови животных в основной группе было в 2,3 раза выше, чем в контрольной группе. Через 3 ч это соотношение составляло 2,1 раза, через 4,5 ч - 1,7 раза, через 6 ч - 2,2 раза, через 8 ч - 1,8 раза, через 12 ч - 1,5 раза, через 24 ч - 2,2 раза. Результаты исследования влияния ГепН на уровень ЦФ в тканях кишечника, печени, в плазме крови и соотношение концентраций антибиотика «ткань печени/плазма крови» мышей иллюстрируют рис. 1-4. Через сутки после введения препаратов содержание ЦФ, как в контрольных, так и в основных группах исследований, в тканях стенки кишечника, печени и плазме крови снижалось (p<0,05). При этом соотношение концентраций антибиотика «ткань печени/плазма крови» не изменялось. Предварительное введение ГепН увеличивало концентрацию ЦФ в ткани стенки кишечника мышей: через 1,5 ч - в 2,0 раза, через 24 ч - в 2,3 раза. В ткани печени животных содержание антибиотика и через 1,5 ч, и через 24 ч наблюдения, в контрольных и основных группах исследования было одинаковым. Уровень ЦФ в плазме крови мышей при введении препарата после предварительной инъекции ГепН был выше, чем после его моновведения: через 1,5 ч и 24 ч в 2,2 и 2,1 раза соответственно. У мышей основной группы через 1,5 ч соотношение концентраций антибиотика «ткань печени/плазма крови» было в 2,4 раза ниже, чем у животных контрольной группы. Через сутки такое снижение показателя составляло 1,9 раза. Заключение Нами подтверждено, что ГепН обладает лимфостимулирующими свойствами. При этом он повышает концентрацию ЦФ в плазме крови экспериментальных животных во всех временных точках наблюдения, вплоть до 24 ч. ГепН увеличивает содержание бета-лактамного антибиотика в ткани стенки кишечника, как через 1,5 ч, так и через сутки после введения. Результаты проведенных исследований показывают, что нефракционированный гепарин проявляет свойства эндолимфатического проводника, направляя введенный вслед за ним ЦФ преимущественно в лимфатическую систему. Это создает высокую концентрацию антибиотика в лимфоузлах по ходу тока лимфы, в которых он может сорбироваться лимфоцитами и захватываться макрофагами [14]. Показано, что лимфоциты способны адсорбировать на своей поверхности до 50% ЦФ, оказавшегося в лимфатическом узле, при этом концентрация антибиотика в них в 10-100 раз выше, чем в жидкой части лимфы и крови [15]. Насыщенные ЦФ лимфоциты поступают в кровеносное русло, а затем в соответствии с патогенезом воспалительной реакции мигрируют в патологический очаг, создавая дополнительный пул препарата в месте борьбы с инфекцией. Возможно, что высокие концентрации антибиотика в тканях обусловлены их диффузией через стенки лимфатических сосудов на всем их протяжении [16]. Медленное продвижение ЦФ по лимфатическим путям, его постепенное высвобождение из лимфатических узлов и последующее поступление в кровь из устья грудного лимфатического протока способствует поддержанию терапевтических концентраций антибиотика в крови [17-20]. Обнаруженное нами уменьшение соотношения концентраций ЦФ «ткань печени/плазма крови» под влиянием гепарина отражает снижение печеночной экстракции антибиотика.

About the authors

German V. Kukushkin

N.I. Pirogov Russian National Research Medical University (RNRMU)

Email: germanpharm@yandex.ru
candidate of medical sciences, professor of the chair of pharmacology “N.I. Pirogov Russian National Research Medical University (RNRMU)”, 117997, Moscow, Russian Federation 117997, Moscow, Russian Federation

M. V Zhuravleva

I.M. Sechenov First MSMU MOH Russia (Sechenovskiy University)

119991, Moscow, Russian Federation

L. P Sviridkina

Peoples’ Friendship University of Russia

117198, Moscow, Russian Federation

D. E Yurov

N.I. Pirogov Russian National Research Medical University (RNRMU)

117997, Moscow, Russian Federation

References

Supplementary files