The diagnostic of viral intestinal infections in children

Abstract

The article presents the results of diagnostic of viral intestinal infections in children of early age with emergency states. At that it is established that in etiological structure of acute intestinal infections viruses make up significant portion (68.5%) of all isolated agents.

Full Text

С овременные эпидемиологические исследования показывают, что в разных странах этиологическая структура острых кишечных инфекций (ОКИ) может значительно различаться. Так, если в развивающихся странах доминируют заболевания бактериальной этиологии, то в экономически развитых до 75-80% всех верифицированных случаев кишечных инфекций имеют вирусную природу [1, 2]. Во многом этому способствует внедрение в лабораторную практику развитых стран новых высокочувствительных методов диагностики, расширивших представления о роли многих новых вирусных агентов в этиологии ОКИ у детей [3-5]. Однако неудовлетворительное состояние лабораторной базы большинства лечебно-профилактических учреждений приводит к тому, что диагностика ОКИ во многих случаях поздняя, нередко они остаются нерасшифрованными, а число диагностических ошибок достигает 12,2- 14,7% и пока не снижается [6, 7]. Данные литературы о частоте ротавирусных инфекций противоречивы, что, по-видимому, обусловлено применением различных методов исследования и критериев диагностики, а также возрастными особенностями. Эти факторы в совокупности способствуют ошибочной диагностике и нерациональному лечению больных с данной патологией [8-11]. Ротавирусная инфекция может диагностироваться уже в первые дни заболевания путем выявления в фекалиях ротавирусного антигена с помощью реакции агглютинации (РА), методом иммуноферментного анализа (ИФА), а также путем обнаружения РНК ротавируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), определения в крови антиротавирусных антител (РСК, ИФА) [12, 13]. Цель нашего исследования - сравнительный анализ различных методов лабораторной диагностики ротави- русной инфекции у детей с неотложными состояниями. Для выявления вирусов в этиоструктуре ОКИ нами были проведены исследования у детей с различными кишечными инфекциями при неотложных состояниях. Объектом исследования были пробы фекалий, взятые у детей с различными кишечными инфекциями при неотложных состояниях. Внедрение новых методов вирусологических исследований позволило уточнить вирусную этиологию ОКИ у 166 (68,5%) детей раннего возраста при неотложных состояниях. Это были различные вирусы в моно- и микстформе, в том числе рота-, энтеро-, астровирусы: у 131 (54,1%) больного ротавирус в сочетании с другими кишечными инфекциями и вирусами, из 104 больных у 46 (44,23%) -энтеровирус (К23, К19, ЕСНО) в моно- и микстформе. Частота ОКИ вирусной этиологии, выявляемой различными диагностическими методами, показана на рисунке. Как видно на рисунке, методом латексной агглютинации (МЛА) ротавирус выявлен у 94 (68,6%) больных из 137, методом иммуноэлектрономикроскопии (МИЭМ) у 35 (33,33%) из 105 детей, а при применении метода ПЦР ■ Ротавирус ■ Энтеровирус □ Астровирус Латекс ИММЭЛ ПЦР ИФА Частота выявления ОКИ вирусной этиологии разными методами. Частота выявления ротавирусов различными методами исследования Возраст 1 - МЛА 2 - МИЭМ 3 - ПЦР ft-2 Л-3 А 2-3 n абс. % n абс. % n абс. % До 6 мес 75 22 29,3 ± 5,3 38 7 18,4 ± 6,3 10 3 30,0 ± 14,5 > 0,05 > 0,05 > 0,05 6-12мес 80 32 40,0 ± 5,5 33 14 42,4 ± 8,6 17 12 70,6 ± 11,1 > 0,05 < 0,02 < 0,05 1-3 года 87 40 46,0 ± 5,3 34 14 41,2 ± 8,4 22 13 59,1 ± 10,5 > 0,05 > 0,05 0,09 В с е г о. 242 94 38,8 105 35 33,3 49 28 57,1 > 0,05 < 0,005 < 0,02 Примечание. n - число детей в возрастных группах; абс. и % - число детей, у которых выявлен ротавирус. вирусы были обнаружены у 40 (81,63%) детей из 49, причем 57,14% составил ротавирус, а 24,4% астровирус. Из них у 13 больных ротавирус и у 6 - астровирус определялись в моно- форме, у 6 - ротавирус сочетался с астровирусом, у 9 - ротавирус с ПМ, у 6 - астровирус с ПМ, лишь у 4 были обнаружены ПМ, а у остальных детей ответ был отрицательным. Частота выявления ротавирусов различными методами у детей разного возраста показана в таблице. Как видно из таблицы, при сравнении различных методов диагностики достоверные различия отмечаются между МЛА и ПЦР (р < 0,005), между МИЭМ и ПЦР (р < 0,02). В группе детей 6-12 мес частота выявления ротавирусов достоверна (р < 0,02, р < 0,005). Как указано выше, при определении ротавирусов у детей для сравнения были использованы различные методы диагностики. Проводя сравнительный анализ результатов исследования МЛА и МИЭМ, выявили, что в обоих случаях у 25 больных ответ на ротавирус был положительным, у 10 детей положительный ответ только при исследовании МИЭМ. В настоящее время диагностические методы при ро- тавирусной инфекции используются для обнаружения цельных вирионов, вирусного антигена, вирусспеци- фической РНК в копрофильтратах, а также специфической сероконверсии. На практике лабораторное подтверждение чаще всего основывается на обнаружении вирусного антигена в копрофильтратах с помощью реакции латекс-агглютинации, реакции пассивной гем- агглютинации и ИФА. Обнаружение специфических антител и нарастание их титра в сыворотке крови больных и переболевших ротавирусным гастроэнтеритом при помощи серологических реакций с целью текущей диагностики не получило широкого распространения в практике и используется в основном для ретроспективного анализа различных эпидемиологических ситуаций. Для определения серотипа ротавируса (что несомненно важно для анализа эпидемической обстановки в каждом конкретном регионе) наиболее применим метод ПЦР- диагностики. Самым частым возбудителем является ротавирус. В структуре ОКИ вирусной этиологии у детей раннего возраста значительную часть занимает ротави- русная инфекция. Клинические проявления ротавирусной инфекции характеризуются острым началом; развитием синдрома интоксикации, симптомов поражения верхних отделов желудочно-кишечного тракта; умеренными катаральными явлениями со стороны верхних дыхательных путей. Частота встречаемости последних и степень их выраженности, по данным разных авторов, существенно различаются. Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что у детей раннего возраста с неотложными состояниями в этиологической структуре острых кишечных инфекций среди всех выделенных возбудителей значительную часть (68,5%) составляют вирусы. Это указывает на необходимость проведения вирусологического анализа проб у детей с неотложными состояниями при острых кишечных инфекциях.