STUDY OF COMPARATIVE PHARMACOKINETICS AND BIOEQUIVALENCE OF DRUGS AMLODIPINE + VALSARTAN AND EXFORGE®

Full Text

Введение К современным стратегиям гипотензивной терапии, которые обеспечивают долговременную приверженность пациента лечению и антигипертензивную эффективность, необходимую для достижения целевых уровней давления, относится применение фиксированных (в 1 таблетке) комбинаций гипотензивных препаратов различных классов с установленной эффективностью, хорошей переносимостью и дополнительными преимуществами у определенных категорий пациентов. В частности, широко используется комбинация блокатора кальциевых каналов, производного дигидропиридина пролонгированного действия - амлодипина [1] и антагониста ангиотензиновых рецепторов II - валсартана1 [2]. В ходе клинических исследований установлено, что комбинация амлодипин+валсартан имеет аддитивный антигипертензивный эффект, снижая давление в большей степени, чем каждый из компонентов отдельно [3-6]. Также показано, что эта комбинация имеет благоприятный профиль переносимости, а дополнительные механизмы действия компонентов минимизируют их характерные побочные эффекты. Так, частота возникновения периферических отеков при применении комбинации амлодипин+валсартан была значимо ниже по сравнению с монотерапией амлодипином [4, 7]. Преимущества фиксированной комбинации амлодипин+валсартан продемонстрированы в клинических исследованиях у пациентов с гипертонией различной степени тяжести, в том числе при неэффективности предшествующей моно- и комбинированной терапии. Фиксированная комбинация амлодипин+валсартан может не только улучшить контроль давления у пациентов с гипертонией, но также обеспечить долговременную приверженность лечению, способствуя, таким образом, максимальной защите от поражения органов-мишеней. Таким образом, можно утверждать, что препарат амлодипин+валсартан является современным комбинированным лекарственным препаратом для лечения артериальной гипертензии пациентам. Стоит отметить, что один из компонентов исследуемой фиксируемой комбинации - амлодипин, входит в перечень жизненно необходимых и важнейших лекарственных препаратов для медицинского применения на 2017 год2. Появление новых дженериков комбинации амлодипин+валсартан обеспечит в ближайшем будущем существенное снижение стоимости лечения артериальной гипертензии и повысит доступность лечения пациентов в РФ. Целью настоящей работы является исследование биоэквивалентности воспроизведённого лекарственного препарата Амлодипин+Валсартан, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 10 мг+160 мг («Польфарма» АО, Польша) в сравнении с препаратом Эксфорж®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 10 мг+160 мг («НовартисФарма АГ», Швейцария). Материал и методы Данное исследование проводилось как исследование биоэквивалентности (БЭ) с целью доказательства эквивалентности воспроизведенного лекарственного препарата препарату сравнения по фармакокинетическим параметрам. Биоэквивалентыми признаются два препарата, если они обладают одинаковыми степенью и скоростью всасывания, распределения и вывода ЛС из организма в равных условиях3 [8]. Исследуемые препараты В качестве исследуемого препарата использовали Амлодипин+Валсартан, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 10 мг+160 мг (Производитель «ПОЛЬФАРМА» АО, Польша), в качестве препарата сравнения использовался препарат Эксфорж®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 10 мг+160 мг (Держатель регистрационного удостоверения (РУ) «НовартисФарма АГ», Швейцария). Дизайн исследования Дизайн исследования - открытое, одноцентровое, сравнительное, рандомизированное, двухэтапное, перекрестное клиническое исследование биоэквивалентности. Дизайн соответствовал утвержденному протоколу исследования (№ Д_ПФ_61/15 Версия 2.0 от 23.05.2016 г.), а также требованиям «Надлежащей клинической практики» (GCP). Дизайн исследований БЭ требует участия здоровых добровольцев и отсутствие приема ими любых лекарственных препаратов и веществ, влияющих на функцию ферментов печени4 [8]. Исследование проходило на базе клинического центра Негосударственное учреждение здравоохранения «Дорожная клиническая больница на станции Ярославль открытого акционерного общества «Российские железные дороги». Данное отделение имеет ограниченный доступ и вход в него осуществляется только под контролем медицинского персонала. Выполнение процедур протокола добровольцами контролировалось персоналом клинического центра. Осуществление процедур исследовательской командой регулируется СОПами клинического центра. Данный клинический центр регулярно проходит внешнюю оценку системы качества и аудиты cпоносоров. В соответствии с дизайном и схемой процедур исследование состояло из периода скрининга, 2-х периодов исследования и 1-го периодов «отмывания». Скрининговый период длился 7 суток. Каждый период исследования длился около 3,5 суток. Период «отмывки» - 21 день. Общая продолжительность исследования составила для добровольцев составила около 32 суток. После подписания информированного согласия, добровольцы проходили физикальный осмотр, лабораторные исследования крови и мочи, анализ мочи на следы наркотиков, тест на содержание алкоголя в выдыхаемом воздухе и тест мочи на беременность для женщин (проводились также перед каждой госпитализацией добровольцев), ЭКГ. Лабораторные исследования крови и мочи, ЭКГ также проводились в промежуточный период, во 2 периоде исследования и на визите завершения исследования. Для удобства рандомизации и проведения исследования добровольцы были распределены на два блока: блок А (24 добровольца), блок B (34 добровольца). Отбор проб для определения концентраций валсартана осуществлялся у добровольцев обоих блоков, тогда как отбор проб для определения концентраций амлодипина осуществлялся только у добровольцев блока А. В каждом периоде у добровольцев блока А отбиралось 23 пробы крови по 6 мл, у добровольцев блока B - 20 проб крови по 4 мл, кроме того проводился дополнительный забор при скрининге не более 18 мл, перед началом 2 периода и по завершению исследования - не более 12 мл. График отбора проб у добровольцев блока А: 0 мин (до приёма препарата); 30 мин,1 ч , 1 ч 20 мин, 1 ч 40 мин, 2 ч, 2 ч 20 мин, 2 ч 40 мин , 3 ч, 3 ч 30 мин, 4 ч , 4 ч 30 мин, 5 ч, 6 ч, 8 ч, 10 ч, 12 ч, 14 ч, 16 ч, 24 ч, 36 ч, 48 ч, 72 ч (всего 23 пробы). График отбора проб у добровольцев блока B: 0 мин (до приёма препарата); 30 мин; 1 ч; 1 ч 20 мин; 1 час 40 мин; 2 часа; 2ч 20 мин; 2 ч 40 мин; 3 ч; 3 ч 30 мин; 4 ч; 4 ч 30 мин; 5 ч; 6 ч; 8 ч; 10 ч; 12 ч; 16 ч; 24 ч; 36 ч (всего 20 проб). Заключение по безопасности препарата было сделано исходя из сравнительной оценки параметров безопасности при приеме исследуемого препарата (Т) и препарата сравнения (R). Размер выборки Для расчета размера полной выборки (блок А+блок В) в данном исследовании использовали коэффициент внутрииндивидуальной вариабельности (CVintra) для высоковариабельного вещества в исследуемом препарате - Валсартана, равный 35% [9-13]. Принимая во внимание величину CVintra, диапазон отношений генеральных средних (μТ/μR=95-105%) и границы биоэквивалентности для фармакокинетических параметров [80-125%] получили, что для обеспечения клинически и статистически значимых результатов (уровень значимости - 5%) в исследование должно быть включено не менее 52 добровольцев, при этом мощность статистического теста будет поддерживаться на уровне 80%. Учитывая возможность выбывания добровольцев во время исследования (после приема препарата), должно быть включено не менее 58 добровольцев. Для расчета размера выборки в блоке А использовали CVintra для низковариабельного вещества в исследуемом препарате - Амлодипина, равный 20% [14-17]. В соответствии с аналогичным полной выборке расчетом в блок А должно быть включено не менее 20 добровольцев, при этом мощность статистического теста будет поддерживаться на уровне 80%. Учитывая возможность выбывания добровольцев во время исследования (после приема препарата), в блок А будет включено 24 добровольца. Аналитический метод Определение амлодипина и валсартана в плазме крови производилось методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. Для каждой временной точки кровь в объеме 4 мл отбиралась в предварительно маркированные полипропиленовые пробирки, обработанные К2ЭДТА. Плазму отделяли центрифугированием в течение 8 минут при 2000 g при температуре 4±4°C не позднее 30 минут после отбора пробы крови. Сразу после центрифугирования полученная плазма из каждой пробирки в равных объемах переносилась в 2 полипропиленовые пробирки (обозначенные как первая и дублирующая). Для промежуточного хранения пробирки помещали в вертикальном положении в ящике с сухим льдом. Образцы плазмы хранились в морозильнике при температуре -20ºС или ниже до отправки в лабораторию фармакокинетики. Оценка фармакокинетических параметров была проведена с использованием программы WinNonlin (PharsightCorp., USA). Статистическая обработка данных была проведена с помощью программы SAS (The SAS Institute Inc., USA). Рассчитанные независимо в двух программах доверительные интервалы, были дополнительно сопоставлены для подтверждения корректности полученных результатов. Оформление результатов выполнялось в соответствии с «Руководство по экспертизе лекарственных средств» (Москва, 2014). Статистический анализ выполнялся в один этап после завершения биоаналитических процедур и расчета фармакокинетических параметров. Гипотеза о биоэквивалентности формулировалась в терминах отношения сравниваемых параметров: ◆нулевая гипотеза об отсутствии эквивалентности: H0: μT/μR<Q1 или μT/μR>Q2; ◆соответствующая альтернативная гипотеза о наличии биоэквивалентности: HA: Q1≤μT/μR≤Q2, где Q1 и Q2 - нижняя и верхняя принятые допустимые границы биоэквивалентности, а μT и μR - генеральные средние показатели сравнения для испытуемого лекарственного средства и препарата сравнения соответственно. Предполагалось, что AUC и Cmax имеют ln-нормальное распределение, а все остальные параметры, исключая Tmax, - нормальное распределение. Для Tmax возможно использовать только непараметрический метод дисперсионного анализа (с использованием ANOVA Wilcoxon теста) и медианный тест (с использованием SAS-процедуры NPAR1WAY). В соответствии с этим положением сравнение средних значений параметров исследуемого и референтного препаратов проводилось на основе мультипликативной модели, а доверительные интервалы строятся для отношений соответствующих средних значений. После проведения логарифмического преобразования эти показатели анализировались с помощью дисперсионного анализа (ANOVA, параметрический метод). Учитывались следующие факторы, вносящие вклад в наблюдаемую вариацию данных: ◆различия между испытуемыми (межиндивидуальные различия); ◆различия между лекарственными средствами; ◆порядок приема препаратов. Также был проведен дисперсионный анализ для определения статистической значимости фактора блок. Вывод о биоэквивалентности сравниваемых препаратов был сделан с использованием подхода, основанного на оценке 90% доверительных интервалов для отношений геометрических средних исследуемых фармакокинетических параметров. Препараты считаются биоэквивалентными, если границы оцененного доверительного интервала находятся в пределах: ◆для Амлодипина: AUC0-72 80-125%; Cmax 80-125%; ◆для Валсартана: AUC0-t 80-125%; Cmax 80-125%. Биоэквивалентными препараты считаются при подтверждении биоэквивалентности для обоих компонентов (амлодипина и валсартана). Результаты В исследовании принимали участие здоровые добровольцы обоего пола в возрасте 18-45 лет. Всего был скринирован 81 доброволец, из них 58 было рандомизировано, 17 (21%) человек - скрининговые неудачи, 6 человек включены в исследовании в качестве дублеров, выбыли из исследовании 4 добровольца. Завершили исследование по протоколу 54 добровольца, однако данные одного из 54 добровольцев исключены из фармакокинетической популяции (из-за повышенной фоновой концентрации (концентрация до начала дозинга) в периоде 2). Следовательно, популяцию для оценки фармакокинетики составили 53 добровольца. Средний возраст добровольцев популяции анализа составил 27,23±7,16 года, рост 170,70±9,97 см, масса тела 68,99±11,76 кг, средний ИМТ 23,78±3,31 кг/м2. Средние показатели гемодинамики добровольцев составили: АД 116,48±10,02/78,91±6,40 мм рт ст.; ЧСС 77,72±7,84 в мин; ЧДД 15,12±1,03 в мин. У всех включенных в активное фазу исследования добровольцев данные лабораторных и инструментальных обследований (общий и биохимический анализ крови, общий анализ мочи, ЭКГ) были в пределах нормы. Данное исследование подтвердило биоэквивалентность исследуемых препаратов: 90% доверительные интервалы для основных параметров находились в пределах приемлемого диапазона биоэквивалентности, т.е. нулевая гипотеза неэквивалентности для соответствующего параметра была отклонена (табл. 1). Геометрические средние значения наименьших квадратов не совпадают со значениями геометрических средних для валсартана, потому что исследование для валсартана не является сбалансированным по последовательностям (объем ФК данных по исследуемому препарату не равен объему данных по препарату сравнения из-за выбывших добровольцев). Оценка безопасности С момента подписания информированных согласий до окончания наблюдения за добровольцами было выявлено 161 нежелательное явление (НЯ) у 50 добровольцев. При анализе данных безопасности и переносимости учитывались все добровольцы, прошедшие рандомизацию и принявшие хотя бы одну дозу исследуемых препаратов. Таким образом, в анализ безопасности не вошли 5 НЯ, которые возникли до приема препаратов, а именно: снижение АД - 3, головокружение - 2. После приема исследуемого препарата Амлодипин+ Валсартан было зарегистрировано 73 НЯ: брадикардия - 2, головная боль - 5, ОРЗ - 1, потеря сознания - 1, рвота - 3, гипотензия - 42, тахикардия - 16, головокружение - 1, сонливость - 2. После приема исследуемого препарата Амлодипин+ Валсартан определенная связь с препаратом НЯ была отмечена в 14 случаях, вероятная - в 41 случае, возможная - в 16 случаях, сомнительная - в 1 случае, неклассифицируемая - в 1 случае. После приема препарата сравнения Эксфорж® было зарегистрировано 83 НЯ: гипотензия - 49, тахикардия - 16, тошнота - 1, брадикардия - 3, головная боль - 6, гипертензия - 2, рвота - 2, сонливость - 3, головокружение - 1. После приема препарата сравнения Эксфорж® определенная связь с препаратом НЯ была отмечена в 14 случаях, вероятная - в 48 случаях, возможная - в 20 случаях, сомнительная - в 1 случае.У 37 добровольцев развилось 2 и более НЯ, у 13 добровольцев - по одному НЯ. НЯ не отмечались у 5 добровольцев. В одном случае тяжесть НЯ была расценена как «умеренная» - потеря сознания, во всех остальных - «легкая». В целом, определенная связь с приемом исследуемых препаратов была отмечена в 28 случаях, возможная связь - в 36 случаях, вероятная - в 90 случаях, сомнительная - в 6 случаях, не классифицируемая - в 1 случае. Во всех случаях исходом НЯ являлось выздоровление. В 3 случаях возникшие НЯ (рвота у добровольца № 32, ОРЗ у добровольца № 11, брадикардия и гипотензия у добровольца № 25) потребовали выведения добровольца из исследования. Серьезных нежелательных явлений, а также случаев возникновения беременности выявлено не было. Большинство зарегистрированных нежелательных явлений были ожидаемы и связаны с фармакодинамическим эффектом исследуемых препаратов. Статистической разницы в частоте развития нежелательных явлений после приема препаратов Амлодипин+Валсартан и Эксфорж® не обнаружено. Препараты имеют сопоставимый профиль безопасности. Обсуждение На основании полученных данных о зависимости «концентрация-время» для каждого добровольца были рассчитаны индивидуальные фармакокинетические параметры, необходимые для оценки биоэквивалентности сравниваемых препаратов. Рассчитанные значения таких фармакокинетических параметров изученных препаратов статистически достоверно не различаются, а разброс индивидуальных значений идентичен для двух препаратов. На рис. 1, 2 представлены усреднённые фармакокинетические кривые амлодипина и валсартана в образцах плазмы добровольцев после приема препаратов исследования. Согласно полученным результатам, 90% доверительные интервалы для основных параметров находились в пределах приемлемого диапазона биоэквивалентности, т.е. нулевая гипотеза неэквивалентности для соответствующего параметра была отклонена. Данное исследование подтвердило биоэквивалентность. Влияние препарата, периода и последовательности для амлодипина было признано незначимым на 5% уровне значимости для AUC(0-72h) и Cmax. Влияние препарата, периода и последовательности для валсартана было признано незначимым на 5% уровне значимости для AUC(0-t), AUC(0-∞), и Cmax. Влияние фактора блок для валсартана было признано незначимым на 5% уровне значимости согласно результатам проведенного анализа. Различие между исследуемым препаратом и препаратом сравнения для tmax было найдено статистически незначимым в соответствии с непараметрическим медианным критерием и критерием Вилкоксона для валсартана, но значимым для амлодипина. Резюме арифметических и геометрических средних для препаратов амлодипин и валсартан представлены в табл. 2-5. Результаты подтверждают, что 90% доверительные интервалы для отношений геометрических средних значений наименьших квадратов исследуемого препарата и препарата сравнения находятся в пределах приемлемого диапазона биоэквивалентности от 80 до 125% для всех основных параметров. В данном исследовании было установлено, что исследуемый препарат Амлодипин+Валсартан, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 10 мг+160 мг и препарат сравнения Эксфорж®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 10 мг+160 мг биоэквивалентны. При анализе безопасности было выявлено, что с момента подписания информированных согласий до окончания наблюдения за добровольцами было выявлено 161 нежелательное явление у 50 добровольцев, из них 5 нежелательных явлений возникло до приема исследуемых препаратов. Во всех случаях исходом НЯ являлось выздоровление. В 3 случаях возникшие НЯ (рвота у 2 добровольцев, брадикардия и гипотензия у одного добровольца) потребовали выведения добровольца из исследования. Серьезных нежелательных явлений, а также случаев возникновения беременности выявлено не было. Большинство зарегистрированных нежелательных явлений были ожидаемы и связаны с фармакодинамическим эффектом исследуемых препаратов. Статистической разницы в частоте развития нежелательных явлений после приема препаратов Амлодипин+Валсартан и Эксфорж® не обнаружено. Препараты имеют сопоставимый профиль безопасности. Заключение В данном исследовании было получено подтверждение биоэквивалентности исследуемого препарата Амлодипин+Валсартан, таблетки, покрытые плёночной оболочкой, 10 мг+160 мг («Польфарма» АО, Польша), и препарат сравнения Эксфорж®, таблетки, покрытые плёночной оболочкой, 10 мг+160 мг (Новартис Фарма АГ, Швейцария). С учетом полученных в ходе исследования результатах был сделан вывод о сопоставимом профиле безопасности исследуемых препаратов.

About the authors

A. L Khokhlov

Road clinical hospital at Yaroslavl station JSC “Russian Railways”; “Yaroslavl medical University”

150047, Yaroslavl, Russian Federation; 150000, Yaroslavl, Russian Federation

A. E Miroshnikov

ClinPharmInvest

150047, Yaroslavl, Russian Federation

A. A Khokhlov

ClinPharmInvest

150047, Yaroslavl, Russian Federation

N. O Pozdnyakov

ClinPharmInvest

150047, Yaroslavl, Russian Federation

E. A Voronina

Road clinical hospital at Yaroslavl station JSC “Russian Railways”

150047, Yaroslavl, Russian Federation

S. A Gerasimchuk

ClinPharmInvest

150047, Yaroslavl, Russian Federation

Yu. V Rybachkova

ClinPharmInvest

150047, Yaroslavl, Russian Federation

K. S Manko

AKRIKHIN

142450, Moscow region, Noginsk district, Staraya Kupavna, Russian Federation

E. G Dubovik

AKRIKHIN

142450, Moscow region, Noginsk district, Staraya Kupavna, Russian Federation

References

Supplementary files