О новых фармакологических эффектах карипазима

Полный текст

Актуальность исследования

Карипазим – ферментный препарат, получаемый из высушенного млечного сока дынного дерева Carica papaya с общей протеолитической активностью 350 ПЕ. По химическому составу он представляет собой сумму водорастворимых протеолитических ферментов, активными компонентами которого являются папаин, химопапаин А и В, пептидаза А и В. По действию аналогичен лекозиму и его составляющим. Согласно инструкции, карипазим используется наружно при ожогах III–а степени для ускорения отторжения струпов и очищения раневых поверхностей от остатков гнойно-некротических тканей [1]. Однако в мировой медицинской практике препарат нашел более широкое применение [2, 3]. В экспериментальных исследованиях показано, что экстракты из различных частей папайи обладают ранозаживляющей [4], противовоспалительной [5], антибактериальной [6], антифунгальной [7] и антиамебной [8] активностью. Имеется опыт использования экстракта листьев растения при лечении лихорадки Денге [9]. Продемонстрировано гипогликемическое, гиполипидемическое [10] и антиоксидантное [11] действие папайи. Применение этого лекарственного растения приводит к снижению артериального давления [12], увеличению диуреза [13], а также к нефропротективному [14], противоопухолевому и иммуномодулирующему [15] эффектам. В нашей стране карипазим наиболее часто используется в неврологии для лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний опорно-двигательного аппарата. При этом препарат вводится методом электро- или фонофореза [16--20]. Установлено, что такая терапия обеспечивает быстрое купирование болевого синдрома, восстановление объема движений, достижение длительной ремиссии заболевания [21]. Многообразие эффектов, которым обладает лекарственное растение Carica papaya, подтолкнуло нас к поиску новых возможностей в использовании млечного сока папайи.

Цель исследования: изучить влияние препарата с протеолитической ферментной активностью карипазима на лимфатический дренаж (ЛД) тканей и фармакокинетику цефотаксима (ЦФ).

Материал и методы

Влияние карипазима на скорость ЛД тканей исследовали на 16 белых беспородных мышах в двух группах животных: контрольной и основной (по 8 животных в каждой группе). Мышам основной группы под общей анестезией за 15 минут до начала определения скорости ЛД тканей в заднюю лапу вводили 0,9 ПЕ карипазима (флаконы по 350 ПЕ, ЗАО «Вифитех», Россия). Животным контрольной группы инъецировали 0,3 мл физиологического раствора. Скорость ЛД тканей определяли по времени (мин) удаления из брыжейки предварительно введенного в нее 2%-ного раствора лимфотропного красителя Evans blau («Merck») в объеме 0,002 мл.

Фармакокинетику ЦФ (клафоран, флаконы по 1,0 г, Авентис Фарма Лтд, Великобритания) изучали на 18-ти половозрелых кроликах весом 3 кг. Животным контрольной группы (9 кроликов) внутримышечно в верхнюю треть задней конечности вводили ЦФ в дозе 140 мг. Кроликам основной группы (9 животных) такую же дозу антибиотика вводили через 5 минут после предварительной инъекции 50 ПЕ карипазима. Забор крови производили из краевой вены уха кроликов в течение суток: через 1,5 и 3 часа, 4,5 и 6 часов, 8, 12 часов и 24 часа после инъекции лекарственных препаратов. Общее количество взятых проб плазмы крови кроликов, в которых проведено определение концентрации антибиотика, составило 126 (по 63 в каждой серии экспериментов).

Дополнительно концентрацию ЦФ определяли у 36-ти белых беспородных мышей весом 20 г в двух контрольных и двух основных группах (по 9 мышей в каждой группе). Животным контрольных групп в мышцу задней лапы вводили 3 мг ЦФ. Мышам основных групп такую же дозу антибиотика вводили через 5 минут после предварительной инъекции 0,9 ПЕ карипазима. Концентрацию ЦФ определяли в тканях печени, стенки кишечника и плазме крови мышей через 1,5 часа (первые группы экспериментов) и 24 часа (вторые группы экспериментов) после введения препаратов. Для оценки состояния процессов элиминации антибиотика печенью рассчитывали соотношение его концентраций «ткань печени/плазма крови».

Концентрацию ЦФ в плазме крови и тканях животных определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Во всех сериях экспериментов дозы препаратов для мышей и кроликов рассчитывали с учетом коэффициента пересчета с человека на животное [22].

Полученные результаты обработаны методами вариационной статистики по Стьюденту для связанных и несвязанных величин.

Результаты

Карипазим укорачивал время выведения лимфотропного красителя из брыжейки мышей с 36,75±0,56 до 28,25±0,59 мин (на 23%, р<0,001).

В плазме крови кроликов (табл. 1) концентрация ЦФ на всем протяжении исследований была выше в группе животных, которым антибиотик вводился после предварительной инъекции карипазима. Так, через 1,5 часа, его содержание в основной группе было выше, чем в контрольной группе, в 2,4 раза, через 3 часа – в 2,6 раза, через 4,5 часа – в 1,7 раза, через 6 часов – в 2,3 раза, через 8 часов – в 1,7 раза, через 12 часов – в 1,8 раза, через 24 часа – в 2,5 раза. Максимальное различие уровня ЦФ в основной и контрольной группах исследований отмечалось через 1,5 и 24 часа после введения препаратов.

 

Таблица 1
Влияние карипазима на концентрацию (мкг/мл) ЦФ в плазме крови кроликов (M±m)
Препараты	Время от начала введения
	1,5 ч	3 ч	4,5 ч	6 ч	8 ч	12 ч	24 ч
ЦФ	35,91±4,87	6,21±0,90	1,81±0,17	0,43±0,06	0,32±0,06	0,25±0,03	0,12±0,01
Карипазим+ЦФ	85,80±4,87 p<0,001	15,86±0,99 p<0,001	3,12±0,44 p<0,05	0,98±0,17 p<0,05	0,54±0,08 p<0,05	0,44±0,05 p<0,01	0,30±0,04 p<0,005

 

Результаты определения концентраций ЦФ в тканях и плазме крови мышей представлены в табл. 2.

 

Таблица 2
Концентрация ЦФ в тканях кишечника, печени (мкг/г), плазме крови (мкг/мл) мышей и соотношение концентраций антибиотика «ткань печени/плазма крови» через 1,5 и 24 часа после его введения различными способами (M±m)
Препараты	Время после введения
	1,5 часа	24 часа
Ткань кишечника
ЦФ Карипазим+ЦФ	0,412±0,072 1,163±0,057; р2<0,001	0,154±0,031; р1<0,05 0,462±0,040; р1<0,001; р2<0,001
Ткань печени
ЦФ Карипазим+ЦФ	0,275±0,021 0,299±0,051; р2>0,2	0,033±0,009; р1<0,001 0,034±0,005; р1<0,001; р2>0,2
Плазма крови
ЦФ Карипазим+ЦФ	0,126±0,021 0,308±0,038; р2<0,001	0,016±0,004; р1<0,001 0,038±0,008; р1<0,001; р2<0,05
Соотношение концентраций «ткань печени/плазма крови»
ЦФ Карипазим+ЦФ	2,18±0,18 0,97± 0,34; р2<0,05	2,06± 0,41; р1>0,2 1,08± 0,10; р1>0,2; р2<0,05
Примечание: р1 – показатель статистической значимости при сравнении концентраций ЦФ в группах животных через 1,5 и 24 часа после введения; р2 – показатель статистической значимости концентраций ЦФ по отношению к группе животных с его моновведением.

 

В ткани кишечника мышей и через 1,5 часа, и через 24 часа, концентрация ЦФ была выше после его введения на фоне карипазима: в 2,8 раза и 3,1 раза соответственно.

Накопление препарата в ткани печени в обеих группах исследования не различалось ни через 1,5 часа, ни через 24 часа.

В плазме крови мышей после инъекции ЦФ на фоне карипазима, по сравнению с моновведением антибиотика, его уровень был выше в 2,4 раза и через 1,5 часа, и через 24 часа наблюдения.

Показатель соотношения концентраций ЦФ «ткань печени/кровь» в основной группе был ниже, чем в контрольной: в 2,2 раза через 1,5 часа, и в 2,3 раза через 24 часа исследования.

Заключение

Результаты наших исследований выявили наличие у карипазима лимфостимулирующих свойств. Его предварительное введение повышает концентрацию ЦФ в плазме крови кроликов по сравнению с моновведением антибиотика во всех временных точках исследования (1,5; 3; 4,5; 6; 8; 12 и 24 часа). Это совпадает с данными, полученными при исследовании уровня антибиотика в плазме крови мышей. Введение ЦФ после инъекции карипазима приводит к увеличению его содержания в ткани кишечника, как через 1,5, так и через 24 часа, но не влияет на накопление антибиотика в печени. Соотношение концентраций ЦФ «ткань печени/кровь» у мышей в основной группе значительно ниже, чем в контрольной группе, и через 1,5 часа, и через 24 часа эксперимента, что косвенно свидетельствует об уменьшении печеночной экстракции антибиотика. Полученные данные свидетельствуют о наличии у карипазима свойств эндолимфатического проводника. Следует отметить, что наши исследования проводились на фоне парентерального введения карипазима, тогда как в клинической практике он применяется в основном местно или электрофоретически. В связи с этим в практике клинической лимфологии мы рекомендуем применять электрофорез карипазима перед инъекцией лекарственных препаратов с использованием других эндолимфатических проводников для усиления лимфотропного действия. Введение карипазима осуществляется с прокладки, подключенной к положительному электроду, располагаемой в области лимфотропной инъекции. Отрицательный электрод размещается по ходу лимфооттока из данного региона. Такая методика проведения электрофореза позволяет дополнительно использовать лимфостимулирующее действие электрического тока малой плотности.

Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Об авторах

Герман Владимирович Кукушкин

ФГАОУ ВО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: exampl@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-5845-588X

к.м.н., профессор кафедры фармакологии педиатрического факультета 

Россия, 117997, Москва

Марина Владимировна Журавлева

ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова (Сеченовский Университет)», Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: exampl@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9198-8661

д.м.н., зам. директора центра клинической фармакологии; профессор кафедры клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней 

Россия, 127051, Москва; 119991, Москва

Людмила Петровна Свиридкина

Управляющая компания доктора Хюннинен

Email: exampl@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-4537-7456

д.м.н., профессор

Россия, 119049, г. Москва

Дмитрий Евгеньевич Юров

ФГАОУ ВО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России

Email: exampl@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-0178-8736

к.м.н., доцент кафедры фармакологии педиатрического факультета

Россия, 117997, Москва

Список литературы

Дополнительные файлы