Microglia and macrophages in the human pineal gland

Dina A. Sufieva; Суфиева Дина Азатовна; Elena A. Fedorova; Фeдорова Елена Анатольевна; Vladislav S. Yakovlev; Яковлев Владислав Станиславович; Igor P. Grigorev; Григорьев Игорь Павлович; Dmitrii E. Korzhevskii; Коржевский Дмитрий Эдуардович

doi:10.17816/medjrf634587

Микроглия и макрофаги в шишковидной железе человека

Авторы: Суфиева Д.А.¹, Фeдорова Е.А.¹, Яковлев В.С.¹, Григорьев И.П.¹, Коржевский Д.Э.¹
Учреждения:
1. Институт экспериментальной медицины
Выпуск: Том 30, № 5 (2024)
Страницы: 455-463
Раздел: Оригинальные исследования
Статья получена: 25.07.2024
Статья одобрена: 22.09.2024
Статья опубликована: 20.11.2024
URL: https://medjrf.com/0869-2106/article/view/634587
DOI: https://doi.org/10.17816/medjrf634587
ID: 634587

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ
Доступ закрыт

Доступ предоставлен
Доступ закрыт

Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация
Полный текст
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Обоснование. В последние два десятилетия было показано, что воспалительные реакции в центральной нервной системе (ЦНС) вовлечены в этиологию большинства неврологических и психиатрических заболеваний, а также старения. Наиболее важными иммунными клетками в ЦНС являются клетки микроглии и макрофаги. На сегодняшний день микроглия и макрофаги изучены в различных частях ЦНС, но не в шишковидной железе человека.

Цель исследования — изучить морфологические особенности, типы и локализацию клеток микроглии эпифиза человека с помощью метода иммуногистохимии.

Материалы и методы. Работа проведена на образцах эпифиза человеческого мозга, взятых от лиц в возрасте от 16 лет до 61 года (n=7). На срезах эпифиза проводили иммуногистохимическую реакцию с использованием антител к Iba1 и TMEM119, избирательным маркерам микроглиоцитов. Частоту встречаемости иммуноокрашенных клеток анализировали статистическими методами.

Результаты. Установлено, что большинство выявленных с помощью иммуногистохимической реакции фагоцитирующих клеток относятся к микроглии, а не к макрофагам. Микроглия при этом представлена как покоящимися формами, так и активированными. Микроглия в шишковидной железе человека, как правило, локализуется в соединительно-тканных трабекулах, как у кровеносных сосудов, так и вдали от них. Микроглиоциты также встречаются в паренхиме эпифиза среди гормон-синтезирующих клеток пинеалоцитов. Отмечено статистически значимое уменьшение числа Iba1- и особенно — TMEM119-иммунореактивных клеток при старении.

Заключение. Настоящее исследование представляет собой первую работу, в которой изучали клетки микроглии и макрофаги в шишковидной железе человека. Установлено превалирование микроглиальных клеток над макрофагами. Морфологические особенности и локализация выявленных типов клеток микроглии свидетельствуют об их участии преимущественно в иммунной защите, а также, вероятно, в регуляции функций пинеалоцитов. Кроме того, получены данные, свидетельствующие об участии микроглиальных клеток в развитии воспаления в эпифизе человека в ходе старения.

Ключевые слова

эпифиз мозга, человек, микроглия, Iba1, TMEM119, старение, нейровоспаление, иммуногистохимия

Полный текст

ОБОСНОВАНИЕ

Эпифиз мозга (шишковидное тело, или пинеальная железа) представляет собой небольшой непарный нейроэндокринный орган, расположенный в задней части III желудочка мозга между задней спайкой и дорсальной хабенулярной спайкой. Это одна из самых крупных структур эпиталамуса [1]. Основным гормоном шишковидной железы является мелатонин, синтез которого подвержен циклическим колебаниям (максимум — ночью). Это обусловливает роль эпифиза в регуляции различных систем организма и процессов в нём (в частности, цикла бодрствование–сон), в осуществлении нейропротекторной и антиоксидантной функций, а также влияние его на репродуктивную и иммунную системы [2]. Шишковидная железа человека имеет дольчатое строение: паренхима, разграниченная соединительнотканными трабекулами, преимущественно представлена фолликулярным или, реже, островковым типом. Основными клетками шишковидной железы являются пинеалоциты (нейросекреторные клетки, вырабатывающие мелатонин). В эпифизе присутствует локальная популяция глиальных клеток, представленная астроцитоподобными клетками и микроглиальными клетками. Встречаются также тучные клетки [1, 3].

В настоящее время одним из ключевых направлений нейробиологии является изучение клеток иммунной системы головного мозга, известных как микроглия. Эти клетки играют ключевую роль в осуществлении защитных механизмов в центральной нервной системе (ЦНС): синтез про- и противовоспалительных цитокинов, фагоцитоз патогенов и погибших клеток, поддержание гомеостаза окружающей ткани, а также регулирование физиологических и патофизиологических процессов в головном мозге [4]. Кроме того, микроглия является одним из ключевых игроков в развитии нейровоспаления при старении («инфламэйджинг»), что делает её объектом пристального внимания исследователей при изучении возрастных изменений в ЦНС [5].

Кальций-связывающий белок Iba1 (ionized calcium-binding adapter molecule 1, ионизированная кальций-связывающая адаптерная молекула 1) является одним из наиболее часто используемых маркеров при исследовании микроглии. Тем не менее Iba1 также встречается в тканевых макрофагах мозга, к числу которых в ЦНС относятся менингеальные макрофаги, периваскулярные макрофаги и макрофаги сосудистого сплетения. Эти клетки отличаются от микроглии как по своему происхождению, так и по функциям [6]. Относительно недавно (в 2016 году) был предложен высокоселективный маркер микроглии — трансмембранный белок 119 (transmembrane protein 119, TMEM119). Использование обоих этих маркеров микроглии/макрофагов даёт возможность получить более полную картину клеточного состава исследуемой структуры головного мозга [6, 7].

Несмотря на большой интерес научного сообщества к микроглии, исследования этой популяции клеток в эпифизе животных немногочисленны и проводились только на крысах [8], в то время как вопрос морфофункциональной организации микроглии эпифиза мозга человека остаётся на сегодня неосвещённым.

Цель исследования — изучение клеток эпифиза мозга человека, проявляющих реакцию на микроглиальные маркеры Iba1 и TMEM119.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Материалом для исследования послужили образцы шишковидной железы человека (n=7) от лиц в возрасте от 16 до 61 года, полученные из архива Отдела общей и частной морфологии федерального государственного бюджетного научного учреждения «Институт экспериментальной медицины» (заключение локального этического комитета № 58-9/1-684 от 11.12.2009 г.).

Образцы шишковидной железы человека фиксировали в этанол-формалине и цинк-этанол-формалине и заливали в парафин по общепринятой методике. С помощью ротационного микротома Microm HM 325 (Thermo Scientific, США) были изготовлены срезы толщиной 7 мкм, которые наклеивали на стёкла с адгезивным покрытием HistoBond+M (Paul Marienfeld GmbH & Co, Германия).

Для иммуногистохимического исследования препаратов эпифиза человека использовали рекомбинантные кроличьи моноклональные антитела против белка Iba1 (клон JM36-62; HUABIO, Китай) в разведении 1:900 и кроличьи поликлональные антитела против белка TMEM119 (Abcam, Великобритания) в разведении 1:1000. В качестве вторичных реагентов выступали козьи антикроличьи антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена из набора Mouse and Rabbit Specific HRP/DAB (ABC) Detection IHC kit — набор для иммуногистохимической детекции мышиных и кроличьих первичных антител, содержащий хромоген 3,3-диаминобензидин (DAB) и вторичные антитела, меченные пероксидазой хрена (HRP) (Abcam, Великобритания). Продукт иммуногистохимической реакции визуализировали с использованием хромогена DAB из набора реагентов DAB+ (Dako, Дания). Ядра подкрашивали квасцовым гематоксилином. Препараты анализировали с помощью микроскопа Leica DM750 с цифровой фотокамерой ICC50 (Leica Microsystems, Германия).

При количественном анализе препаратов анализировали последовательные срезы, окрашенные на Iba1 и TMEM119: всего 4 случая, возраст — 16, 20, 35 и 61 год. Подсчёт иммунопозитивных клеток производили по 5 полям зрения для каждого случая.

Статистическая обработка данных. Данные представлены в виде среднего ± стандартная ошибка среднего. Сравнительный анализ количества Iba1- и TMEM119-иммунопозитивных клеток производили с помощью критерия Стьюдента для парных выборок. Для сравнения возрастных особенностей в количестве Iba1- и TMEM119-иммунореактивных клеток использовали однофакторный дисперсионный анализ и критерий Тьюки (post-hoc анализ). Значимыми различия считали при p <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Исследование препаратов шишковидной железы человека, окрашенных к кальций-связывающему белку Iba1, показало: данный маркер распределён в телах и отростках клеток микроглии однородно, что позволяет охарактеризовать морфологию этих клеток. Выявлено, что Iba1-иммунореактивные клетки в эпифизе локализуются неравномерно и преимущественно наблюдаются в соединительнотканных трабекулах (рис. 1, a). Как правило, Iba1-иммунопозитвные клетки визуализируются в области кровеносных сосудов. Эти клетки имеют морфологию типичной периваскулярной микроглии: веретеновидную форму и два полярных длинных неветвящихся отростка (рис. 1, c; рис. 1, d, одиночная стрелка). Такую же морфологию имеют микроглиоциты, локализующиеся по обе стороны от границы соединительнотканных трабекул и паренхимы эпифиза (рис. 2, f). В паренхиме шишковидной железы человека Iba1-иммуноположительные клетки наблюдаются редко. Здесь они чаще всего представлены клетками овальной формы, с разнонаправленными отростками, их можно отнести к типу отростчатой, или рамифицированной, микроглии (см. рис. 1, с, двойная стрелка). Встречаются округлые Iba1-иммунореактивные клетки либо без отростков, либо с короткими и толстыми отростками, их можно отнести к активированному, или амёбоидному, типу микроглии (см. рис. 1, d, головки стрелок).

Рис. 1. Преимущественная локализация микроглии/макрофагов в трабекулах эпифиза мозга человека. Иммуногистохимическая реакция на Iba1 (a, c, d) и TMEM119 (b); ядра окрашены квасцовым гематоксилином; a, b — разница в количестве Iba1- и TMEM119-иммунопозитивных клеток на последовательных срезах эпифиза; c, d — разные морфотипы микроглии: одиночной стрелкой (d) указана периваскулярная микроглия, двойной стрелкой — отростчатая микроглия, головки стрелок — амёбоидная микроглия. Масштабный отрезок равен 200 мкм (a, b); 50 мкм (c) и 20 мкм (d).

Fig. 1. Preferential localization of microglia/macrophages in the trabeculae of the pineal gland of the human brain. Immunohistochemical reaction for Iba1 (a, c, d) and TMEM119 (b); nuclei stained with alum hematoxylin; a, b — difference in the number of Iba1- and TMEM119-immunopositive cells on consecutive sections of the pineal gland; c, d — different morphotypes of microglia: single arrow (d) indicates perivascular microglia, double arrow — ramified microglia, arrow heads — amoeboid microglia. The scale bar is 200 μm (a, b); 50 μm (c), and 20 μm (d).

Рис. 2. Микроглия эпифиза человека. Иммуногистохимическая реакция на TMEM119 (a, b, d) и Iba-1 (c, e, f). Ядра окрашены квасцовым гематоксилином. Стрелки указывают на периваскулярную микроглию (a, b); микроглию, примыкающую к кальцификатам — К (c, d); микроглию, локализующуюся на границе трабекулы и паренхимы (f); головки стрелок указывают на фагоцитирующую микроглию (b, e). Масштабный отрезок равен 20 мкм.

Fig. 2. Microglia of the human pineal gland. Immunohistochemical reaction to TMEM119 (a, b, d) and Iba-1 (b, e, f). Nuclei are stained with alum hematoxylin. Arrows indicate perivascular microglia (a, b); microglia adjacent to calcificates — К (c, d); microglia localized at the border of trabecula and parenchyma (f); arrow heads indicate phagocytic microglia (b, e). The scale bar is 20 μm.

В результате иммуногистохимической реакции к трансмембранному белку TMEM119 установлено, что этот маркер характеризуется равномерным распределением в телах и отростках микроглии. TMEM119-иммунопозитивные клетки характеризуются наличием округлого или овального тела и, как правило, толстых разветвлённых отростков (рис. 2, a, b). Продемонстрировано, что TMEM119-иммуноположительные микроглиоциты также преимущественно выявляются в трабекулах, а у кровеносных сосудов они имеют морфологию периваскулярной микроглии (см. рис. 2, a, b).

Во всех образцах эпифиза человека с разной частотой наблюдались плотные включения — кальциевые конкреции (кальцификаты, мозговой песок), которые располагались в паренхиме. Анализ Iba1- и TMEM119-иммунореактивных клеток в шишковидной железе человека показал, что лишь небольшое число отдельных анализируемых клеток наблюдаются рядом с кальцификатами и могут примыкать к ним (рис. 2, c, d). Встречались также фагоцитирующие микроглиоциты, которые окружали своими отростками соседние клетки с пикнотическими ядрами (рис. 2, b, e).

При изучении образцов от лиц старшего возраста (свыше 60 лет) отмечено значительное уменьшение числа Iba1- и TMEM119-иммунопозитивных клеток. При этом TMEM119-иммунореактивные микроглиоциты формируют очаги (кластеры), как правило, по периферии органа. Iba1-иммунопозитивные клетки преимущественно имеют округлое тело и не имеют отростков. В образце эпифиза от человека пожилого возраста наблюдается большое число гранул нейромеланина.

При визуальной оценке последовательных срезов, окрашенных на Iba1 и TMEM119, можно наблюдать, что число Iba1-иммунореактивных клеток больше по сравнению с TMEM119-иммунопозитивными клетками (см. рис. 1, a; рис. 1, b). Однако статистически значимые различия (при проведении статистического анализа с помощью t-критерия для парных выборок) удалось обнаружить только для образца от человека, возраст которого составлял 61 год. При сравнении зависящего от возраста количества Iba1- и TMEM119-иммунопозитивных клеток с применением дисперсионного анализа ANOVA (с последующим применением post-hoc критерия Тьюки) установлены статистически значимые индивидуальные различия в количестве Iba1-иммунореактивных клеток между образцами от лиц в возрасте 16 и 20 лет и в количестве TMEM119-иммунореактивных клеток между образцами от лиц в возрасте 20 лет и 61 год (p <0,05).

ОБСУЖДЕНИЕ

Исследование клеток иммунной системы ЦНС является одним из магистральных направлений современной нейробиологии, в связи с чем актуальной проблемой, стоящей перед учёными, служит подбор адекватных подходов и маркеров для анализа клеток иммунной системы изучаемой области. Использованные в работе иммуногистохимические маркеры микроглии/макрофагов Iba1 и маркер микроглии TMEM119 обладают следующими преимуществами: Iba1 позволяет выявлять и клетки микроглии, и макрофаги ЦНС, в то время как TMEM119 является высокоселективным маркером микроглии; оба этих маркера выявляют как клеточные тела, так и отростки исследуемых клеток, что даёт возможность косвенно оценить степень активности клеток по морфологическим характеристикам. Известно, что клетки микроглии, характеризующиеся небольшой сомой и длинными, тонкими, ветвящимися отростками, относятся к типу рамифицированной или покоящейся микроглии. А микроглиоциты, характеризующиеся увеличенными размерами тела, короткими, толстыми, слабоветвящимися отростками, представляет собой амёбоидный, или активированный, тип микроглии.

Вместе с тем эти маркеры обладают и рядом недостатков. Так, использование только маркера Iba1 не позволяет разделить между собой популяции микроглии и макрофагов, которые, как известно, различаются происхождением, рядом физиологических и функциональных характеристик, а также экспрессируемыми маркерными белками [9]. При воспалительных процессах экспрессия белка TMEM119 в клетках микроглии провоспалительного типа (М1) подавляется, что сильно затрудняет использование данного маркера в исследованиях, связанных с нейровоспалением [7, 10, 11]. Такие особенности маркеров следует учитывать при постановке иммуногистохимических реакций, а также интерпретации полученных данных.

В настоящем исследовании установлено, что подавляющее большинство фагоцитирующих клеток структурно нормального эпифиза мозга человека — это не макрофаги, а микроглиоциты, которые представлены как покоящимися (рамифицированная микроглия), так и активированными формами (малоотростчатая микроглия). При морфологической оценке и количественном сравнении Iba1- и TMEM119-иммунопозитивных клеток обнаружено, что Iba1-иммунопозитивные клетки выявляются стабильно в большем числе, чем TMEM119-иммунопозитивные клетки, хотя статистически значимые различия наблюдались только у лиц пожилого возраста. Это может указывать, что либо небольшая часть общего пула иммунных клеток эпифиза человека представлена макрофагами, либо во всех исследованных образцах эпифиза часть клеток микроглии представлена провоспалительным типом М1 [12].

Продемонстрировано, что микроглия в шишковидной железе располагается, как правило, в соединительнотканных трабекулах, где локализуется подавляющее большинство кровеносных сосудов органа. Клетки здесь имели морфологию периваскулярной микроглии: веретеновидную форму и два полярных длинных неветвящихся отростка, распластанных вдоль сосуда. Шишковидная железа относится к структурам секреторного типа, в связи с чем имеет густую сеть кровеносных сосудов, являясь одним из самых васкуляризованных органов человека [3]. Предполагается, что периваскулярная микроглия задействована в контроле поступающих из кровотока веществ, а также обеспечивает защитные механизмы от проникновения возможных патогенов в эпифиз мозга, что объясняет её преимущественную локализацию в области кровеносных капилляров. В работе [13] показана роль микроглии и в регуляции локального мозгового кровообращения за счёт синтеза цитокинов, которые могут влиять на ширину просвета капилляров. В работе M.P. Ibañez Rodriguez и соавт. [14] установлено, что микроглия может участвовать в фагоцитозе фрагментов кровеносных сосудов не только в эмбриогенезе и у молодых животных, но и у взрослых особей.

Микроглиальные клетки в соединительнотканных трабекулах также располагались вдали от кровеносных сосудов внутри трабекулы или на границе с паренхимой — по всей вероятности, вдоль коллагеновых волокон, которые, как нами ранее было показано, образуют сеть внутри трабекулы и имеют разную плотность распределения [15]. В исследованиях последних лет показано, что микроглия участвует в направленной деградации внеклеточного матрикса за счёт секреции металлопротеиназ и других ферментов, что необходимо для регуляции пластичности синаптических связей [16, 17]. Внеклеточный матрикс представляет собой динамичную сеть белков (в частности, коллагенов) и протеогликанов, которая важна для поддержания структурной целостности ткани и может ремоделироваться при заболеваниях и травмах [16]. Несколько исследований показывают, что внеклеточный матрикс существенно различается в разных областях мозга по количеству, составу и степени ремоделирования в процессе старения [17]. Роль микроглии в ремоделировании внеклеточного матрикса была показана при инсульте, болезни Альцгеймера и хорее Гентингтона [16]. Продемонстрировано, что физиологическое старение снижает высвобождение микроглиальными клетками металлопротеиназ и других ферментов, разрушающих внеклеточный матрикс, и это приводит к избыточному его отложению в околосинаптической области, снижению структурной пластичности нейронных сетей и ухудшению когнитивных функций [17]. Наблюдаемое нами уменьшение числа микроглиоцитов (рис. 3) и снижение их функциональной активности может служить одним из факторов избыточного формирования коллагеновых волокон в эпифизе человека при физиологическом старении [15].

Рис. 3. Возрастная динамика изменения количества Iba1- и TMEM119-иммунореактивных клеток в эпифизе человека. Данные представлены в виде среднего ± ошибка среднего; * p <0,05.

Fig. 3. Age-related changes in the number of Iba1⁺ and TMEM119⁺ immunoreactive cells in the human pineal gland. Data are expressed as mean ± standard error, * p <0.05.

Результаты данной работы свидетельствуют, что в паренхиме шишковидной железы микроглия представлена преимущественно рамифицированным типом (покоящаяся), хотя встречаются и малоотростчатые (активированные) формы микроглиальных клеток. Локализация клеток микроглии среди пинеалоцитов позволяет предполагать их участие в регуляции функциональной активности мелатонин-синтезирующих клеток-пинеалоцитов. Это подтверждается и литературными данными. Так, в культуре клеток однодневных крысят Sprague Dawley (Спрег-Доули) было показано, что микроглия взаимодействует с пинеалоцитами и влияет как на структуру, так и на функцию этих клеток [18]. Авторы показали, что совместное культивирование микроглии и пинеалоцитов вызывает уменьшение длины отростков пинеалоцитов и увеличение содержания серотонина — предшественника мелатонина — в культуральной среде через 7 дней [18]. В другой работе установлено, что микроглия посредством синтеза ряда цитокинов влияет на функциональный статус пинеалоцитов, таким образом модулируя работу шишковидной железы [19]. В уже упоминавшемся исследовании M.P. Ibañez Rodriguez и соавт. [14] показано, что клетки микроглии могут фагоцитировать серотонин-содержащие нервные волокна эпифиза.

Если в структурно-интактном эпифизе у лиц молодого и среднего возраста пул фагоцитирующих клеток представлен в основном микроглиоцитами, то при старении можно наблюдать, что число TMEM119-иммунореактивных клеток уменьшается (p <0,05 при индивидуальном сравнении), а число Iba1-иммунопозитивных клеток становится статистически значимо больше (p <0,05) по сравнению с числом TMEM119-иммунопозитивных клеток. Наблюдаемое нами меньшее число TMEM119-иммунопозитивных клеток при старении может быть связано с увеличением провоспалительного типа микроглии, для которого характерно подавление синтеза белка TMEM119 [11, 14]. Второе объяснение уменьшения числа TMEM119-иммунореактивных клеток может быть связано с тем фактом, что при старении в эпифиз рекрутируются макрофаги, дифференцирующиеся из моноцитов периферической крови, также вследствие возрастного нейровоспаления [14].

В настоящем исследовании показано, что небольшой пул микроглиоцитов контактирует с кальцификатами и примыкает к ним. Взаимодействие микроглии и кальцификатов в шишковидной железе ранее не изучали. Тем не менее образование кальцификатов и микроглии анализировали в других областях ЦНС (сосудистое сплетение, хабенула, базальные ганглии, гиппокамп, мозговые оболочки) [20]. При этом результаты исследования U. Maheshwari и соавт. [20] показали, что, как правило, кальцификаты ассоциированы со стенками кровеносных сосудов в этих областях головного мозга. Отмечено также, что как для животных, так и для человека с мутациями в генах, участвующих в развитии и функционировании микроглии, характерно присутствие внутримозговых кальцификатов [20]. Предполагается, что микроглия имеет важное значение в контроле образования кальцификатов за счёт регуляции формирования отложений нерастворимых солей кальция (которые, как считается, могут служить очагами отложения кальцификатов) путём либо удаления апоптотических клеток, либо протеостаза внеклеточного матрикса [20].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Использованные нами маркеры микроглии/макрофагов Iba-1 и TMEM119 позволили впервые в мире охарактеризовать иммунные клетки эпифиза человека и установить гетерогенность популяции пинеальных микроглиоцитов человека. Установлено, что большинство выявленных фагоцитирующих клеток являются микроглией, а не макрофагами. Микроглия при этом представлена как покоящимися формами, так и активированными. Микроглия в шишковидной железе человека, как правило, выявляется в соединительнотканных трабекулах, как у кровеносных сосудов, так и вдали от них. Микроглиоциты встречаются и в паренхиме эпифиза, а также могут примыкать к кальцификатам. Предполагается, что микроглия имеет важное значение в контроле образования кальцификатов в ЦНС, в том числе и в эпифизе. Различная локализация микроглии, а также разнородность морфотипов, представленных в шишковидной железе, свидетельствуют о функциональной гетерогенности клеток микроглии. Присутствие активированных и фагоцитирующих форм микроглии предполагает их активную роль в поддержании гомеостаза окружающей ткани и активности пинеалоцитов, что свидетельствует о многофункциональности микроглиоцитов и подтверждает гипотезу об их важной роли в регуляции нейроэндокринной функции эпифиза. Дальнейшие исследования микроглии и макрофагов эпифиза (как с использованием экспериментальных животных, так и на человеческом материале), анализ морфологических, цитохимических, функциональных особенностей этих клеток помогут установить роль каждого из типов микроглии и макрофагов в поддержании тканевой и функциональной целостности шишковидной железы и оценить вклад этих клеток в развитие патологического нейровоспаления, которое может привести к дисфункции эпифиза.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Источник финансирования. Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБНУ «Институт экспериментальной медицины» (№ FGWG-2024-0015).

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов.

Вклад авторов. Все авторы подтверждают соответствие своего авторства международным критериям ICMJE. Наибольший вклад распределён следующим образом: Д.А. Суфиева — анализ данных, написание рукописи; Е.А. Федорова — сбор и обработка материала, анализ данных; В.С. Яковлев — сбор и обработка материала; И.П. Григорьев — концепция и дизайн исследования, написание и редактирование рукописи; Д.Э. Коржевский — концепция и дизайн исследования, редактирование рукописи.

Этическое утверждение. Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом Института экспериментальной медицины (№ 3/24 от 20.06.2024).