Comparative pharmacokinetics of levofloxacin in the saliva and blood plasma of patients with pneumonia

Full Text

АКТУАЛЬНОСТЬ

Левофлоксацин относится к группе фторхинолонов III поколения и на сегодняшний день представляет собой один из ведущих антибиотиков с широким спектром антибактериальной активности. Его высокая эффективность, безопасность и экономическая доступность способствовали широкому применению в пульмонологии, оториноларингологии, хирургии, нефрологии, урологии, фтизиатрии, а также использованию при лечении особо опасных инфекций [1]. К действию препарата высокочувствительны грамположительные микроорганизмы (включая лекарственно устойчивые пневмококки), грамотрицательные бактерии и внутриклеточные возбудители. Левофлоксацин обладает оптимальными фармакокинетическими характеристиками, что является предиктором его успешного клинического применения. Удобство приема (1 р/сут) препарата также обусловливает его привлекательность для практического применения. Существенным преимуществом левофлоксацина следует считать его доступность как в парентеральной, так и в пероральной форме, что определяет возможность использования антибиотика в рамках ступенчатой терапии [2]. Эффективность терапии зависит от ряда параметров: выбора адекватной дозировки антибиотика, приверженности пациента к терапии и др. Коррекция дозы может потребоваться при возникновении неблагоприятных эффектов, особенно у лиц с почечной недостаточностью (клиренс креатинина меньше 50 мл/мин), при возникновении резистентности патогена к левофлоксацину в диапазоне терапевтически эффективных концентраций и проч. [3, 4].

Не менее важно учитывать комплаентность пациентов и вовремя выявлять отклонения от назначенной схемы приема антибиотика. Разработка рациональных схем лечения и дозирования препарата требует проведения мониторинга концентрации антибактериальных препаратов и фармакокинетических исследований с целью прогнозирования его клинической и микробиологической эффективности [5]. Левофлоксацин все чаще используется для лечения внебольничной пневмонии (ВП) из-за его мощного бактерицидного действия [6], более высокой концентрации препарата в крови, обширного тканевого распределения и более высокой биодоступности [7]. Фармакокинетические/фармакодинамические исследования последних лет доказали, что бактерицидная активность левофлоксацина зависит от его концентрации в плазме крови и тканях [8], и этот показатель возрастает с увеличением концентрации препарата в определенном диапазоне [9].

Доказательства клинической и микробиологической эффективности, а также хорошей переносимости левофлоксацина получены в ходе многочисленных клинических исследований; об этом же свидетельствует и многолетний опыт его применения. Неслучайно левофлоксацин занимает уникальное место в современных схемах антибактериальной терапии инфекций нижних дыхательных путей у взрослых [1].

На сегодняшний день установлена взаимосвязь между величиной минимальной подавляющей концентрации (МПК) антибиотика в отношении возбудителя инфекции и его фармакокинетикой. Существуют определенные фармакокинетические параметры, оценка которых позволяет достоверно предсказывать бактериологическую эффективность более чем в 80% случаев. Основной параметр — время, в течение которого концентрация антибиотика в крови превышает его минимальную подавляющую концентрацию для конкретного возбудителя (t >МПК) [10]. Эффективность левофлоксацина также может прогнозироваться с помощью площади под фармакокинетической кривой (AUC_0–24) [11].

Концентрации левофлоксацина не всегда достигает желаемого уровня при введении в стандартной дозе, поэтому измерение концентраций левофлоксацина в плазме или других альтернативных матрицах (слюна и др.) может помочь клиницистам принимать обоснованные решения о дозировке, режиме введения и т. д. Терапевтический лекарственный мониторинг с использованием отбора проб слюны имеет ряд преимуществ перед забором образцов плазмы [12]. Слюна как объект исследования представляет особый интерес для фармакокинетиков в связи с простотой и неинвазивностью отбора проб для анализа и может рассматриваться как альтернатива плазме крови при изучении фармакокинетических параметров [13, 14].

Обнаруженная для некоторых препаратов прямая зависимость между их содержанием в слюне и плазме позволяет использовать слюну для фармакокинетических и биофармацевтических исследований [15, 16].

Цель исследования — изучение сравнительной фармакокинетики левофлоксацина в плазме и слюне пациентов с внебольничной пневмонией и оценка возможности использования слюны в качестве альтернативной матрицы для отбора проб при проведении фармакокинетических исследований.

Научно-исследовательская работа была одобрена локальным этическим комитетом при ГБУЗ «ГКБ им. И.В. Давыдовского Департамента здравоохранения г. Москвы». Все участники подписали информированное согласие на проведение клинического исследования.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Анализ проб с целью определения левофлоксацина в плазме крови и слюне проводили на системе высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) Agilent 1200 (Agilent, США), включающей бинарный насос, автосамплер, термостат колонок, спектрофотометрический детектор (ультрафиолетовый (УФ) детектор) с переменной длиной волны в диапазоне 190–600 нм. Обработку данных проводили при помощи программного обеспечения ChemStation (Agilent, США). Для хроматографического разделения использовали хроматографическую колонку Eclipse-XD8 C18 (150×4,6 мм; 5 мкм) (Agilent, США). Анализ проводили с использованием УФ-детектирования при длине волны λ=285 нм. Элюирование осуществляли смесью ацетонитрил/вода в соотношении 30:70 с добавлением 0,1% муравьиной кислоты в изократическом режиме. Скорость потока — 0,8 мл/мин; объем пробы вводимой в аналитическую систему — 50 мкл; температура термостата колонки — 23 °С. Время удерживания левофлоксацина в этих условиях составило 4,85±0,11 мин. Для количественного определения левофлоксацина использовали метод абсолютной калибровки. Для оценки линейности методики осуществляли построение калибровочной кривой и для извлечения левофлоксацина из плазмы и/или слюны готовили его концентрированный (маточный) раствор в этиловом спирте с концентрацией 1 мг/мл. Методом последовательных разведений получили серию стандартных растворов в диапазоне концентраций 0,2–10 мкг/мл. Калибровочные модельные смеси готовили внесением в интактную плазму крови и/или слюну соответствующих стандартных растворов левофлоксацина. Диапазон концентраций выбирали на основании интервала концентраций, ожидаемого в данном исследовании.

Пробоподготовку биопроб осуществляли методом осаждения белков. Во все образцы плазмы крови и/или слюны объемом 200 мкл добавляли по 600 мкл 50% трифторуксусной кислоты, интенсивно встряхивали на Vortex 2 IKA в течение 1 мин. Затем пробы центрифугировали 10 мин при 4500 об/мин. Верхний слой супернатанта переносили в хроматографические виалы и анализировали на ВЭЖХ.

Валидацию методики проводили согласно требованиям Руководства по экспертизе лекарственных средств [17] и Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (Food and Drug Administration, FDA) [18]. Предел обнаружения левофлоксацина в слюне и плазме крови составил 0,2 мкг/мл. Метод сохранял линейность в диапазоне концентрации от 0,2 до 8 мкг/мл, с коэффициентом регрессии R²=0,995 для плазмы крови и R²=0,991 — для слюны. Степень извлечения левофлоксацина составляла 87%. Прецизионность и точность характеризовалась коэффициентом вариации менее 5%, что соответствует валидационным требованиям для методов определения препаратов в биожидкостях.

В фармакокинетическом исследовании принимали участие 10 здоровых добровольцев (6 мужчин, 4 женщины) от 30 до 45 лет и 10 пациентов с ВП нетяжелого течения, возраст 42±10,3 лет, 5 мужчин и 5 женщин с клинически и лабораторно-инструментально подтвержденным диагнозом ВП. Масса тела испытуемых составляла от 54 до 92 кг.

Пациенты и добровольцы принимали 1 таблетку (доза 500 мг) левофлоксацина внутрь утром, натощак. Отбор образцов крови и слюны осуществляли до (исходная проба крови) и через 0,5; 1; 1,5; 2; 3; 4; 6; 8; 10 и 24 ч после приема препарата. Отобранную кровь центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 мин для отделения плазмы. Отделенную плазму хранили при температуре –35 °С до проведения анализа. Отобранную слюну фильтровали, полученные фильтраты хранились в морозильнике при температуре –35 °С до момента проведения анализов.

Расчет фармакокинетических параметров исследуемых препаратов был проведен с помощью фармакокинетической программы Kineticа 4.4.1 (2004, Termo Corporation, США). Определялись следующие фармакокинетические параметры: C_max — максимальная концентрация препарата (мкг/мл); Т_max — время достижения максимальной концентрации (ч); AUC_0–t — площадь под фармакокинетической кривой в диапазоне от 0 до последней экспериментальной точки на кривой (мкг×час/мл); AUC_0–∞ — общая площадь под фармакокинетической кривой с нулевой точки до бесконечности (мкг×ч/мл); t_1/2 — период полувыведения (ч), MRT — среднее время удержания лекарственного средства в крови (ч); Cl/F — клиренс (л/час); Vss/F — общий объем распределения (л).

Статистический анализ был выполнен при помощи компьютерной программы Statistica 6.0 (Dell, США). Все статистические расчеты проводились для 95% доверительного интервала. Полученные результаты анализировались методами описательной статистики, с расчетом значений среднего (M), среднего геометрического (G_mean), стандартного отклонения (SD), медианы (M±m) и коэффициента вариации (CV, %).

Оценка достоверности различий между парными выборками значений концентраций препаратов в плазме крови и слюне; а также фармакокинетических параметров, рассчитанных по данным в плазме и слюне, проведена с использованием критерия Манна–Уитни и корреляционно-регрессионного анализа. Различия считались достоверными при р ≤0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

В исследовании были определены концентрации левофлоксацина в плазме крови и слюне после 1-кратного перорального приема в дозе 500 мг пациентами с ВП и добровольцами. Усредненные фармакокинетические кривые представлены на рис. 1 и 2, где анализируемое вещество определялось в течение 24 ч.

 

Рис. 1. Фармакокинетические профили левофлоксацина в плазме крови и слюне пациентов с внебольничной пневмонией после 1-кратного перорального приема в дозе 500 мг.

Fig. 1. Pharmacokinetic profiles after a single oral dose of 500 mg of levofloxacin in the blood plasma and saliva of patients with community-acquired pneumonia.

 

Рис. 2. Фармакокинетические профили левофлоксацина в плазме крови и слюне добровольцев после 1-кратного перорального приема в дозе 500 мг.

Fig. 2. Pharmacokinetic profiles after a single oral dose of 500 mg of levofloxacin in the blood plasma and saliva of volunteers.

 

Максимальная концентрация в плазме крови и слюне пациентов с ВП достигалась через 1 ч после приема препарата и составляла С_max=5,98±2,89 мкг/мл и С_max=4,41±3,83 мкг/мл соответственно. Затем концентрация левофлоксацина начинала экспоненциально снижаться в обеих биожидкостях и уже через 9 ч уменьшалась более чем на 60% от C_max.

Достижение максимальной концентрации в плазме крови и слюне наблюдалось также через 1 ч после приема изучаемого препарата добровольцами: 5,52±3,07 мкг/мл для плазмы крови, 3,25±0,85 мкг/мл. К 24 ч в среднем обнаруживалось в плазме крови 0,79±0,4 мкг/мл, в слюне — 0,63±0,34 мкг/мл.

Параметры описательной статистики индивидуальных значений концентрации левофлоксацина в плазме и слюне испытуемых приведены в табл. 1 и 2.

Наблюдается значительная индивидуальная вариабельность концентраций внутри группы в плазме крови (25,3–52,7%) и слюне (10,7–68,9%) пациентов с ВП согласно данным табл. 1.

 

Таблица 1. Статистические параметры индивидуальных уровней концентраций левофлоксацина в плазме крови и слюне пациентов с внебольничной пневмонией после приема внутрь препарата в дозировке 500 мг (n=10)

Table 1. Statistical parameters of individual concentration levels after the oral administration at 500 mg of levofloxacin in the blood plasma and saliva of patients with community-acquired pneumonia (n=10)

Показатели	Время, ч
	0	0,5	1	1,5	2	3	4	6	9	12	24
Концентрация левофлоксацина (мкг/мл) в плазме
Mean	0	5,25	5,98	5,23	4,85	4,25	3,97	3,07	2,08	1,49	0,71
Gmean	0	4,01	5,19	5,07	4,72	4,01	3,81	2,92	2,00	1,39	0,64
SD	0	2,77	2,89	1,45	1,23	1,44	1,21	1,12	0,6	0,62	0,3
СV, %	0	52,7	48,3	27,8	25,3	33,8	30,3	36,5	28,8	41,9	42,3
Median	0	5,71	7,65	5,61	5,06	4,25	4,03	2,77	2,17	1,23	0,75
Концентрация левофлоксацина (мкг/мл) в слюне
Mean	0	3,12	4,41	4,14	3,99	3,37	2,91	1,94	1,65	1,23	0,73
Gmean	0	2,04	3,83	3,64	3,68	3,16	2,74	1,81	1,53	1,12	0,72
SD	0	2,15	2,22	2,05	1,73	1,28	1,13	0,79	0,78	0,63	0,08
СV, %	0	68,9	50,5	49,5	43,5	37,8	38,7	40,9	47,7	50,8	10,7
Median	0	3,91	3,94	3,91	3,28	3,16	2,87	2,07	1,49	1,11	0,69

Примечание: ВП — внебольничная пневмония; Mean — среднее; G_mean — среднее геометрическое; SD — стандартное отклонение; Median — медиана; CV — коэффициент вариации.

 

Среди статистических параметров, приведенных в табл. 2, наблюдается значительная индивидуальная вариабельность концентраций внутри группы в плазме крови (9,7–60,3%) и слюне (16,4–54,8%) добровольцев. При этом имеются достоверные различия (р ≤0,05) между средними концентрациями левофлоксацина в слюне и плазме в обеих группах.

 

Таблица 2. Статистические параметры индивидуальных уровней концентраций левофлоксацина в плазме крови и слюне добровольцев после приема внутрь препарата в дозировке 500 мг (n=10)

Table 2. Statistical parameters of individual concentration levels after the oral administration of the drug at 500 mg of levofloxacin in the blood plasma and saliva of volunteers (n=10)

Показатели	Время, ч
	0	0,5	1	1,5	2	3	4	6	9	12	24
Концентрация левофлоксацина (мкг/мл) в плазме
Mean	0	3,08	5,52	4,98	4,31	3,68	3,44	2,64	2,09	1,59	0,79
Gmean	0	2,38	4,16	4,9	4,29	3,64	3,77	2,61	2,07	1,57	0,71
SD	0	1,85	3,07	1,01	0,42	0,56	0,74	0,49	0,31	0,27	0,41
СV, %	0	60,3	55,7	20,0	9,7	15,3	21,5	18,6	14,6	16,7	51,1
Median	0	2,94	5,71	4,78	4,32	3,61	3,29	2,62	2,06	1,56	0,66
Концентрация левофлоксацина (мкг/мл) в слюне
Mean	0	1,65	3,29	3,17	2,84	2,34	2,17	1,29	1,03	1,02	0,63
Gmean	0	1,43	3,18	2,96	2,78	2,31	2,08	1,28	1,21	0,98	0,57
SD	0	0,91	0,85	1,16	0,59	0,44	0,72	0,21	0,27	0,32	0,34
СV, %	0	54,8	25,9	36,5	20,8	18,9	33,0	16,4	22,1	30,9	54,4
Median	0	1,38	3,47	3,26	2,81	2,41	2,16	1,22	1,12	1,01	0,51

Примечание: Mean — среднее; G_mean — среднее геометрическое; SD — стандартное отклонение; Median — медиана; CV — коэффициент вариации.

 

По полученным усредненным данным был проведен корреляционно-регрессионный анализ между средними значениями концентраций левофлоксацина в плазме крови и в слюне добровольцев и пациентов с ВП (рис. 3, 4).

 

Рис. 3. Регрессионный анализ усредненных концентраций в плазме и слюне пациентов с внебольничной пневмонией.

Fig. 3. Regression analysis of mean plasma and saliva concentrations in patients with community-acquired pneumonia.

 

Рис. 4. Регрессионный анализ усредненных концентраций в плазме и слюне добровольцев.

Fig. 4. Regression analysis of mean concentrations in plasma and saliva of volunteers.

 

Между исследуемыми признаками и в пробах пациентов с ВП и в пробах добровольцев выявлена высокая степень линейной корреляции, сила связи признаков по шкале Чеддока весьма высокая. Коэффициент корреляции (r) между средними значениями концентраций левофлоксацина в плазме крови и в слюне пациентов с ВП составил 0,953, добровольцев — 0,977. Коэффициент детерминации (R²) уравнения парной линейной регрессии в плазме крови и в слюне пациентов с ВП и добровольцев равен 0,913 и 0,96 соответственно. Средняя ошибка аппроксимации не превышает 10%.

Полученные экспериментальные данные концентрации левофлоксацина обработали с использованием метода математического моделирования, что позволило рассчитать параметры фармакокинетики. Значения усредненных фармакокинетических параметров лево флоксацина после однократного приема внутрь пациентами с ВП и добровольцами представлены в табл. 3 и 4.

 

Таблица 3. Значение фармакокинетических параметров левофлоксацина после однократного приема внутрь пациентами с внебольничной пневмонией в дозе 500 мг

Table 3. The value of the pharmacokinetic parameters of levofloxacin after a single oral administration at 500 mg in patients with community-acquired pneumonia

	AUC0-t, мкг×ч/мл	AUC0-∞, мкг×ч/мл	Cmax, мкг/мл	Тmax, ч	t1/2, ч	MRT, ч	Cl/F, л/ч	Vss/F, л
Плазма (пациенты с ВП)
Mean	51,34	61,36	7,11	1,10	8,92	12,36	8,32	101,8
Gmean	50,41	60,67	7,00	1,00	8,28	11,43	8,22	94,14
SD	11,04	10,06	1,32	0,55	4,04	5,68	1,48	48,64
CV,%	21,5	16,4	18,5	49,8	45,2	45,9	17,8	47,8
Median	51,10	59,40	7,65	1,00	7,80	10,80	8,40	91,00
Слюна (пациенты с ВП)
Mean	39.96	50,48	5,55	1,30	9,96	14,08	10,12	147,22
Gmean	38,92	49,86	5,45	1,08	9,82	13,65	10,00	137,15
SD	10,19	8,82	1,13	0,97	1,89	3,91	1,78	61,02
CV,%	25,5	17,5	20,4	64,9	19,0	27,8	17,6	41,4
Median	38,60	48,90	5,67	1,00	8,90	12,10	10,20	128,40

Примечание: ВП — внебольничная пневмония; Mean — среднее; G_mean — среднее геометрическое; SD — стандартное отклонение; Median — медиана; CV — коэффициент вариации.

 

Таблица 4. Значение фармакокинетических параметров левофлоксацина после однократного приема внутрь пациентами с внебольничной пневмонией в дозе 500 мг

Table 4. The value of the pharmacokinetic parameters of levofloxacin after a single oral administration at 500 mg in patients with community-acquired pneumonia Показатели

	AUC0–t, мкг×ч/мл	AUC0–∞, мкг×ч/мл	Cmax, мкг/мл	Тmax, ч	t1/2, ч	MRT, ч	Cl/F, л/ч	Vss/F, л
Плазма (добровольцы)
Mean	36,40	50,97	6,26	1,08	7,38	9,70	9,93	98,43
Gmean	35,27	50,58	6,03	1,00	7,28	9,60	9,86	96,50
SD	10,52	6,90	2,00	0,49	1,37	1,56	1,30	20,68
CV, %	28,9	13,5	31,9	45,4	18,6	16,1	13,1	21,0
Median	33,75	49,40	5,83	1,00	6,95	9,30	10,15	101,9
Слюна (добровольцы)
Mean	20,57	28,83	4,08	1,58	6,02	8,69	17,55	147,83
Gmean	20,48	28,62	3,95	1,47	5,73	8,19	17,42	143,00
SD	2,06	3,88	0,74	0,74	2,06	3,23	2,32	38,54
CV, %	10,0	13,5	18,5	46,5	34,2	37,2	13,2	26,1
Median	20,20	28,40	4,08	1,50	5,55	8,11	17,55	147,55

Примечание: Mean — среднее; G_mean — среднее геометрическое; SD — стандартное отклонение; Median — медиана; CV — коэффициент вариации; C_max — максимальная концентрация препарата; Т_max — время достижения максимальной концентрации; AUC_0–t — площадь под фармакокинетической кривой в диапазоне от 0 до последней экспериментальной точки на кривой; AUC_0–∞ — общая площадь под фармакокинетической кривой с нулевой точки до бесконечности; t_1/2 — период полувыведения, MRT — среднее время удержания лекарственного средства в крови (час); Cl/F — клиренс; Vss/F — общий объем распределения.

 

Сравнительный анализ фармакокинетических параметров (табл. 3) показал, что у пациентов с ВП AUC_0–∞ в плазме крови (61,36±10,08 мкг×ч/мл) больше AUC_0–∞ в слюне (50,48±8,82 мкг×ч/мл). Период полувыведения и время удерживания левофлоксацина в слюне имеет тенденцию к увеличению. Левофлоксацин достаточно долго удерживается в организме и составляет 12,36±5,68 ч в плазме крови и 14,08±3,91 ч — в слюне пациентов с ВП.

При анализе представленных данных видно, что в плазме крови добровольцев площадь под фармакокинетической кривой составила 50,97±6,90 мкг×ч/мл, период полувыведения — 7,38±1,37 ч и время удерживания 9,70±1,56 ч, причем была меньше (28,83±3,88 мкг×ч/мл) и обнаруживалась тенденция к уменьшению периода полувыведения (6,02±2,06 ч) и времени удерживания (8,69±3,23 ч) по сравнению со слюной.

ОБСУЖДЕНИЕ

Как видно из полученных данных, средние концентрации левофлоксацина в слюне достоверно ниже, чем в плазме крови в обеих группах. Соответственно значения площадей под кривой (AUC_0-t и AUC_0-∞) при сравнении слюны и плазмы крови в этих группах также достоверно различаются. Для AUC_0-t в группе пациентов с ВП р=0,028, в группе добровольцев р=0,038. Для AUC_0-∞ в группе пациентов с ВП р=0,044, в группе добровольцев р=0,0012. При сравнительном анализе фармакокинетических параметров наблюдается практически одинаковая скорость всасывания из желудочно-кишечного тракта у пациентов с ВП и здоровых добровольцев. Остальные фармакокинетические параметры левофлоксацина, рассчитанные по его концентрациям в плазме крови и слюне добровольцев и пациентов с ВП статистически достоверно не различаются. Однако при корреляционно-регрессионном анализе наблюдается высокая корреляционная зависимость между средними концентрациями в слюне и плазме как у пациентов с ВП (r=0,96), так и в группе добровольцев (r=0,98). Полученные данные свидетельствуют о возможности использования слюны в качестве альтернативы плазме крови. Использование слюны вызывает интерес еще и потому, что концентрация лекарственных веществ в слюне характеризует уровень несвязанного с белками фракции лекарственного средства в плазме крови. Это особенно важно для веществ, имеющих высокий коэффициент связывания с белками крови.

Также было выполнено сравнение фармакокинетических параметров по концентрации левофлоксацина в плазме крови и слюне между пациентами с ВП и добровольцами. Достоверных различий между этими группами не наблюдалось. Это дает возможность использовать слюну как для терапевтического лекарственного мониторинга, так и для других фармакокинетических исследований.

ВЫВОДЫ

1. Фармакокинетические параметры слюны и плазмы крови достоверно не различаются у пациентов с ВП и добровольцев.
2. Обнаружена значительная прямая корреляция между средними концентрациями и фармакокинетическими параметрами в слюне и плазме крови как в группе добровольцев, так и в группе пациентов с ВП.
3. Показана возможность использования слюны в качестве биоматериала при изучении фармакокинетики левофлоксацина.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ / ADDITIONAL INFO

Источник финансирования. Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России № 056-00005-21-00 на проведение прикладных научных исследований (номер государственного учета НИР 121022000154-2).

Funding source. The work was carried out within the framework of the state assignment of the Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products of the Ministry of Health of Russia No. 056-00005-21-00 for conducting applied scientific research (state registration number NIR 121022000154-2).

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.

Вклад авторов. Все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией. Наибольший вклад распределен следующим образом: Л.М. Красных — проведение эксперимента, анализ полученных данных и расчет фармакокинетических параметров; О.А. Горошко — расчет статистических параметров и написание статьи; Н.Г. Бердникова — дизайн эксперимента и отбор биологических образцов; Д.В. Цыганко — разработка концепции и отбор исследуемых групп пациентов и добровольцев; В.Г. Краснянская — пробоподготовка биообразцов для проведения эксперимента; О.А. Чеча — работа с литературными источниками для подготовки статьи.

Author contribution. All authors made a substantial contribution to the conception of the work, acquisition, analysis, interpretation of data for the work, drafting and revising the work, final approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work. Author contributions: L.M. Krasnykh conducted the experiment, analyzed the data obtained, and calculated the pharmacokinetic parameters; O.A. Goroshko calculated the statistical parameters and wrote the article; N.G. Berdnikova created the experiment design and selected the biological samples; D.V. Tsyganko developed the concept and selected the study groups of patients and volunteers; V.G. Krasnyanskaya prepared the biosamples for the experiment; O.A. Checha worked with literary sources to prepare the article.

About the authors

Liudmila M. Krasnykh

Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products

Author for correspondence.
Email: krasnyh@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0003-3650-6014

MD, Cand. Sci. (Biol.)

Russian Federation, Moscow

Olga A. Goroshko

Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products

Email: goroshko@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0003-0448-3612

MD, Cand. Sci. (Pharm.)

Russian Federation, Moscow

Dmitry V. Tsyganko

I.V. Davydovsky State Clinical Hospital; I.M. Sechenov First Moscow State Medical University

Email: riverdrinkins@mail.ru
Russian Federation, Moscow; Moscow

Nadezhda G. Berdnicova

I.V. Davydovsky State Clinical Hospital; I.M. Sechenov First Moscow State Medical University

Email: berdnad@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2036-7403

MD, Cand. Sci. (Med.)

Russian Federation, Moscow; Moscow

Viktoria G. Krasnyanskaya

Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products

Email: krasnyanskaya65@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-7604-8172
Russian Federation, Moscow

Olga A. Checha

Scientific Centre for Expert Evaluation of Medicinal Products

Email: checha@expmed.ru
ORCID iD: 0000-0002-7900-1078

MD, Cand. Sci. (Biol.)

Russian Federation, Moscow

References

Supplementary files